|
Оглавление
 От редактора...................... 5 П.Л. Привалов. Калориметрические исследования растворов биополимеров.............. 7 1. Введение....................... 7 2. Техника сканирующей микрокалориметрии..................... 9 3. Калориметрические измерения........... 13 4. Результаты...................... 15 4.1. Глобулярные белки.............. 15 4.2. Фибриллярные белки............. 19 4.3. Нуклеиновые кислоты............. 22 4.4. Лип иды..................... 28 Литература................. 29 Г.Е.Добрецов. Исследование структуры белков методом флуоресцентных зондов.......... 34 1. Введение...................... 34 2. Флуоресцентные зонды............... 35 3. Определение параметров связывания зондов с белками...................... 38 4. Центры белков, связывающие зонды....... 42 5. Определение параметров связывания лигандов с белками с помощью зондов............ 49 6. Свойства центров связывания, регистрируемые флуоресцентным зондом.............. 51 7. Определение размеров и формы белковых молекул с помощью зондов.............. 63 8. Изучение структурных перестроек в белках..................... 74 9. Изучение ассоциации белковых молекул..... 81 10. Изучение сложных белково-липицных комплексов........... 84 11. Сочетание метода флуоресцентных зондов с другими методами................ 86 12. Заключение.................... 90 13. Исследования белков, выполненные методом флуоресцентных зондов (Приложение)...... 91 Литература....................... 93 С.М.Дудкин. В.Г.Сахаровскийу Применение метода ЯМР для изучения структуры и функции ферментов...................... 105 1. Введение...................... 105 2. Основные понятия спектроскопии ЯМР...... 106 3. Характеристика спектров ЯМР ферментов............................. 111
4. Отнесение сигналов в спектрах ЯМР ферментов......... 122
5. Изучение структуры и конформационных превращений ферментов........................................................... 127
6. Фермент-лигананые взаимодействия....... 130
7. Применение метоца ЯМР для изучения активного центра РНКазы А............... 136
8. Заключение.................... 144
Литература.................... 144
В. П. Алмазов, Е.Н. Твердохлебов. Применение метода остановленной струи в молекулярной
биологии...................................................................... 153
1. Введение...................... 153
2. Экспериментальная техника метода остановленной струи.................... 155
3. Применение метода остановленной струи для исследования ферментативных реакций....... 163
3.1. Кинетика ферментативных реакций в начальной стадии реакции............. 163
3.2. Определение концентрации активных центров фермента.............. 176
3.3. Стадия, лимитирующая скорость реакции......... 177
3.4. Зависимость от рН кинетических параметров (на примере химотрипсина)...... 180
3.5. Обнаружение и идентификация промежуточных комплексов............. 182
3.6. Выбор кинетической схемы реакции................ 187
3.7. Некоторые методические приемы для исследования ферментативных реакций..................... 195
3.7.1. Метод вытеснения ирофпавина................. 195
3.7.2. Кинетический изотопный метод..................... 196
3.7.3. Применение рН -индикаторов............ 200
4. Применение метода остановленной струи для изучения кинетики конформационных переходов у ферментов..................... 203
5. Изучение денатурации и ренатурации белков.................. 212
6. Изучение взаимодействий лигандов с белками 219
7. Изучение нуклеиновых кислот........... 225
8. Некоторые другие области применения метоца остановленной струи.............. 231
9. Заключение................... 232
Литература........................ 233
|